caveolin-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400102-LAC

CAV1 kodiert Caveolin-1, ein integrales Membran-Scaffolding-Protein, das Caveolae organisiert und die Signaltransduktion an der Plasmamembran koordiniert. Caveolin-1 reguliert Endozytose, die Homöostase von Lipiden und Cholesterin sowie die Mechanotransduktion und moduliert Signalwege wie Integrin/FAK-Signaling, die Aktivität von Src-Familienkinasen, die endotheliale Stickstoffmonoxid-Signalgebung und TGF-β-assoziierte Remodeling-Prozesse. Über seine Effekte auf Rezeptor-Trafficking und die Zusammensetzung von Membran-Mikrodomänen beeinflusst Caveolin-1 Zellmigration, Barrierefunktion und Stressantworten. Eine dysregulierte CAV1-Expression und veränderte Caveolae-Dynamik wurden mit kardiovaskulären und metabolischen Phänotypen, fibrosebezogenen Prozessen und tumorassoziiertem Zellverhalten in Verbindung gebracht, was seine breite Eignung als zentraler Knotenpunkt in Signalwegen für zell- und molekularbiologische Studien unterstreicht.

caveolin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CAV1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

caveolin-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CAV1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen caveolin-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CAV1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.