Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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cathepsin D 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-419875-NIC
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- cathepsin D Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- cathepsin D 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 cathepsin D 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Ctsd을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 cathepsin D Antibody (D-7): sc-377299
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
cathepsin D 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-419875-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cathepsin D 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2) | sc-419875-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Ctsd는 엔도-리소좀 시스템으로 전달된 뒤, 엔도사이토시스 및 오토파지로 유입된 화물을 대상으로 대량 및 선택적 단백질 분해를 매개하는 리소좀성 아스파르틸 엔도펩티다아제인 카텝신 D를 암호화한다. 카텝신 D는 단백질 턴오버, 리소좀 생합성, 항원 처리 과정을 조절함으로써 오토파지–리소좀 플럭스, 엔도좀 수송, 스트레스 반응과 연관된 세포 항상성 프로그램에 영향을 미친다. CTSD 활성 또는 발현의 변화는 신경퇴행과 리소좀 축적 질환 양상과 연관되어 왔으며, 또한 세포외기질 리모델링과 미세환경에서의 생존 신호전달에 대한 영향으로 종양 생물학과도 관련이 있다. 따라서 Ctsd는 마우스 모델에서 리소좀 기능장애, 단백질 항상성(proteostasis) 붕괴, 염증성 신호전달을 연구하기 위한 기전적 핵심 노드로 널리 사용된다.
cathepsin D 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Ctsd 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Ctsd 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Ctsd의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Ctsd 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.