CaMKII delta Double Nickase Plasmid (h): sc-400811-NIC

CAMK2D kodiert CaMKII‑Delta, eine Ca2+/Calmodulin‑abhängige Serin/Threonin‑Kinase, die intrazelluläre Calciumsignale in Phosphorylierungsprogramme übersetzt, welche die Erregungs‑Kontraktions‑Kopplung, die Organisation des Zytoskeletts und die Gen-Transkription steuern. CaMKII‑Delta ist an Ca2+-abhängigen Signalkaskaden nachgeschaltet von Ionenkanälen und G‑Protein‑gekoppelten Rezeptoren beteiligt und prägt Signalwege wie die MAPK‑Signalübertragung sowie transkriptionelle Antworten, die durch CREB und verwandte Regulatoren vermittelt werden. In menschlichen Geweben wird die Aktivität von CAMK2D häufig im Kontext der Physiologie von Herz- und glatter Muskulatur untersucht, wo veränderte Calciumhandhabung und Kinase‑Signalgebung mit maladaptiven Remodeling‑Phänotypen in Verbindung stehen. Eine fehlregulierte CaMKII‑Delta‑Signalgebung wurde außerdem hinsichtlich ihrer breiteren Rollen in Stressantworten, Zellüberleben und entzündlichen Signalnetzwerken untersucht, die für die kardiometabolische und neurovaskuläre Forschung relevant sind.

CaMKII delta Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CAMK2D-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CAMK2D abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CAMK2D-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CAMK2D-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.