Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CaMKII beta Antibody (D-6): sc-376828. Western blot analysis of CaMKIIβ expression in untreated HeLa (A), chemically-treated HeLa (B, C), untreated K-562 (D) and chemically-treated K-562 (E) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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CaMKII beta双切口酶质粒(h): sc-402744-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CaMKII beta 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CaMKII beta双切酶质粒（h）和CaMKII beta双切酶质粒（h2）编码针对CAMK2B的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CaMKII beta: sc-100366，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CaMKII beta双切口酶质粒(h) | sc-402744-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CaMKII beta双切口酶质粒(h2) | sc-402744-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMK2B 编码 CaMKII β 亚基，这是一种钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸/苏氨酸激酶亚基，能够将细胞内 Ca2+ 的瞬时变化“解码”为磷酸化事件，从而调控突触信号传递与结构可塑性。CaMKII β 参与全酶复合体的组装并与 F-肌动蛋白相互作用，将 Ca2+ 内流与细胞骨架重塑、树突棘动态变化以及活动依赖性的基因表达联系起来。它位于谷氨酸能信号及 Ca2+ 进入通路的下游，协调长时程增强（LTP）和神经元发育等过程。CaMKII β 活性或表达失调与神经发育相关表型及神经元兴奋性改变有关，提示其在脑功能机制研究及疾病相关信号网络研究中具有重要意义。
CaMKII beta 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CAMK2B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CAMK2B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CAMK2B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CAMK2B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。