Plasmide Double Nickase (h) c-Maf: sc-410543-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) c-Maf correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide c-Maf Double Nickase (h) et le plasmide c-Maf Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAF. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: c-Maf Antibody (6B8): sc-293420
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) c-Maf | sc-410543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) c-Maf | sc-410543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAF code pour le facteur de transcription c‑Maf, une protéine à fermeture éclair de leucines basique (bZIP) qui se fixe sur des éléments de reconnaissance Maf afin de réguler les décisions de destin cellulaire et les programmes de différenciation spécifiques des tissus. c‑Maf intègre des signaux issus des voies des cytokines et du développement, façonnant des réseaux transcriptionnels qui influencent la prolifération, les réponses au stress et la polarisation des cellules immunitaires, notamment via des rôles dans la différenciation des lymphocytes T auxiliaires et la fonction des macrophages. Une activité dérégulée de MAF/c‑Maf a été associée à des programmes transcriptionnels oncogéniques et à une régulation иммунitaire altérée, et elle est également impliquée dans des processus de développement de l’œil et du système nerveux. Ces propriétés font de c‑Maf un nœud utile pour disséquer le contrôle transcriptionnel de la spécification des lignages, l’adaptation métabolique et l’expression génique dépendante du contexte dans des systèmes modèles humains.
c-Maf Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAF. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAF. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAF.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.