Plásmido Doble Nickase (h) BRAT1: sc-415146-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)BRAT1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa BRAT1 (h) y el plásmido de doble nickasa BRAT1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BRAT1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) BRAT1 | sc-415146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) BRAT1 | sc-415146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BRAT1 (activador 1 de ATM asociado a BRCA1) codifica una proteína nuclear implicada en la respuesta al daño del ADN, donde interactúa con la señalización de ATM/ATR y con vías asociadas a BRCA1 para mantener la estabilidad del genoma. BRAT1 se ha relacionado con la regulación del control de los puntos de control del ciclo celular y con la supervivencia celular tras el estrés genotóxico, en consonancia con funciones en la coordinación de eventos de fosforilación aguas abajo y la activación de vías de reparación. La alteración o disfunción de BRAT1 se asocia a fenotipos del neurodesarrollo y neurológicos, y se ha estudiado en el contexto de trastornos caracterizados por una reparación del ADN deficiente y por respuestas de estrés mitocondrial o metabólico. En consecuencia, BRAT1 es de interés para estudios mecanísticos de la señalización de los puntos de control, el estrés replicativo y el mantenimiento del genoma en células humanas.
BRAT1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BRAT1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BRAT1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BRAT1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BRAT1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.