Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
BMP-9 Double Nickase Plasmid (h): sc-402887-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das BMP-9 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- BMP-9 Double-Nickase-Plasmid (h) und BMP-9 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GDF2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: BMP-9: sc-514211
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
BMP-9 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BMP-9 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Wachstumsdifferenzierungsfaktor 2 (GDF2), der für Bone Morphogenetic Protein 9 (BMP‑9) kodiert, ist ein zirkulierender Ligand der TGF‑β‑Superfamilie, der überwiegend über die Typ‑I‑Rezeptoren ALK1/ACVRL1 und ALK2 zusammen mit BMPR2 signalisiert und dabei SMAD1/5/9‑abhängige Transkriptionsprogramme aktiviert. In humanen endothelialen und mesenchymalen Kontexten trägt BMP‑9 zur Regulation vaskulärer Ruhe, zum angiogenen Remodelling und zur differenzierungsassoziierten Genexpression bei; dabei beeinflusst Signalweg‑Crosstalk mit MAPK‑ und PI3K‑Signalen zellzustandsabhängige Antworten. Eine Fehlregulation der BMP‑9/ALK1‑Signalgebung ist eng mit vaskulärer Pathobiologie verknüpft, einschließlich hereditärer hämorrhagischer Teleangiektasie und pulmonalarterieller Hypertonie, und eine veränderte BMP‑9‑Aktivität wurde zudem in Bezug auf Fibrose, Entzündung und die Biologie des Tumormikromilieus untersucht. Als ligandengetriebener Signalweg bietet BMP‑9 außerdem eine gut zugängliche Achse, um Rezeptor‑Ligand‑Spezifität und nachgeschaltete, SMAD‑abhängige Transkription in relevanten primären und gentechnisch modifizierten Zellsystemen zu untersuchen.
BMP-9 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GDF2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GDF2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GDF2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GDF2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.