BMP-8B Lentiviral Activation Particles (h): sc-404893-LAC

BMP8B kodiert das Bone Morphogenetic Protein 8B (BMP-8B), einen sezernierten Liganden der TGF-β‑Superfamilie, der über Serin/Threonin‑Kinaserezeptoren vom Typ I/II signalisiert und SMAD‑abhängige Transkriptionsprogramme aktiviert. BMP-8B beeinflusst Zellschicksalsentscheidungen, Differenzierung und Prozesse des Gewebeumbaus und ist in ein breiteres Crosstalk‑Netzwerk der BMP/TGF-β‑Signalwege eingebunden, das entwicklungs- und homöostasebezogene Genexpression prägt. In der Humanbiologie werden veränderte BMP‑Signaldynamiken häufig im Kontext fehlregulierter Differenzierung, fibroseassoziiertem Remodeling und Signalgebung im Tumormikromilieu untersucht, wodurch BMP8B ein nützlicher Knotenpunkt für Pathway‑Mapping und funktionelle Genomik ist. Als ligandengetriebene Pathway‑Komponente ist BMP8B zudem relevant für Studien zu parakriner Signalübertragung, Regulation des Sekretoms und nachgeschalteten SMAD‑Zielgen‑Netzwerken.

BMP-8B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente BMP8B-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

BMP-8B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der BMP8B-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen BMP-8B-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen BMP8B-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.