Bmi-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-417606-LAC

BMI1 kodiert Bmi-1, eine zentrale Komponente des Polycomb-Repressorkomplexes 1 (PRC1), der transkriptionelles Silencing durch Chromatinkondensation und Monoubiquitinierung von Histon H2A an Lysin 119 vermittelt. Bmi-1 reguliert Selbsterneuerung, Linienfestlegung und die replizierende Lebensspanne, indem es zentrale Programme der Zellzyklus- und Seneszenzkontrolle reprimiert, darunter den CDKN2A-Lokus (p16^INK4a/p14^ARF). Über diese epigenetischen Mechanismen beeinflusst es DNA-Schadensantworten, die Toleranz gegenüber oxidativem Stress sowie die Aufrechterhaltung von Stamm- und Vorläuferzellen. Eine fehlregulierte BMI1-Aktivität wurde mit aberranter Proliferation, veränderten Differenzierungszuständen und tumorassoziierten Transkriptionsprogrammen in Verbindung gebracht und ist daher ein breit untersuchter Knotenpunkt der Onkogenese und der Krebsstammzellbiologie.

Bmi-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente BMI1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Bmi-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der BMI1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Bmi-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen BMI1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.