Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO BICD2 (h): sc-405525
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- BICD2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique BICD2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BICD2 Antibody (E-12): sc-393631
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO BICD2 (h) | sc-405525 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
BICD2 (bicaudal D homolog 2) code un adaptateur de la dynéine–dynactine qui couple les cargos au transport vers l’extrémité « moins » des microtubules, soutenant le trafic à longue distance dans des cellules polarisées telles que les neurones. En reliant des vésicules, des endosomes et des organites à la dynéine cytoplasmique, BICD2 contribue à l’organisation de l’appareil de Golgi, au positionnement des endosomes, à la dynamique de l’enveloppe nucléaire et à des processus liés au cycle cellulaire, notamment l’orientation du fuseau mitotique. Le transport dépendant de BICD2 s’inscrit à l’interface de voies régissant l’homéostasie axonale et le trafic membranaire, où une délivrance précise des cargos est requise pour le maintien des neurones. Des variations génétiques de BICD2 ont été associées à des phénotypes neuromusculaires, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie des motoneurones et des défauts de transport intracellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BICD2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BICD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BICD2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BICD2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BICD2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BICD2 pour l'étude de la signalisation de BICD2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de BICD2 essentiels à la fonction de BICD2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BICD2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le BICD2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BICD2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BICD2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le BICD2 plasmide HDR (h) et le BICD2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BICD2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BICD2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.