Bex2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404711

Übersicht

BEX2 (brain expressed X-linked 2) kodiert Bex2, ein kleines, intrinsisch ungeordnetes Protein, das in neuralem und anderem Gewebe angereichert ist und als kontextabhängiger Modulator transkriptioneller Programme sowie von Protein-Protein-Interaktionsnetzwerken fungiert. Beschriebene Aktivitäten verorten Bex2 an der Schnittstelle zwischen Neurotrophin-Signalgebung und Stressantwortwegen und beeinflussen die neuronale Differenzierung, die Zellzykluskontrolle und die Apoptose über Interaktionen, die MAPK/ERK- und verwandte Überlebenssignalwege modulieren können. Eine veränderte BEX2-Expression wurde in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten beschrieben, darunter neuroentwicklungsbezogene Prozesse und die Tumorbiologie, wo sie mit Veränderungen der Proliferation, von Linien-/Differenzierungsprogrammen und Therapieansprech-Phänotypen in Verbindung gebracht wurde. Diese Eigenschaften machen BEX2 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um die Kopplung von Signalgebung an Transkription und Zellschicksalsentscheidungen in menschlichen Zellmodellen zu untersuchen.

Das Bex2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BEX2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BEX2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BEX2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Bex2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BEX2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Bex2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BEX2-Exone abzielen, die für die Bex2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BEX2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Bex2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Bex2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BEX2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Bex2 HDR-Plasmid (h) und Bex2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BEX2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BEX2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.