Plasmide Double Nickase (m) beta Arrestin 1: sc-430955-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) beta Arrestin 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide beta Arrestin 1 Double Nickase (m) et le plasmide beta Arrestin 1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Arrb1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: beta Arrestin 1 Antibody (25-G10): sc-53780
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) beta Arrestin 1 | sc-430955-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Arrb1** code la **bêta-arrestine 1**, un adaptateur multifonctionnel qui régule la désensibilisation, l’internalisation et le trafic des récepteurs couplés aux protéines G (RCPG/GPCR), tout en servant de plateforme d’assemblage pour des complexes de signalisation. Au-delà du découplage classique des récepteurs, la bêta-arrestine 1 coordonne des cascades de kinases, notamment MAPK/ERK, et peut moduler les voies PI3K–AKT et NF-κB, reliant ainsi l’activité des récepteurs membranaires à des réponses transcriptionnelles et cytosquelettiques. Par ces interactions, Arrb1 contribue au contrôle de la migration cellulaire, de la signalisation inflammatoire et de la réactivité des systèmes neuronal et immunitaire. Des altérations de la signalisation dépendante des arrestines ont été associées à une dérégulation des réseaux de signalisation des récepteurs, pertinente pour la biologie des cancers, la régulation métabolique et les processus neuro-inflammatoires, faisant d’Arrb1 un nœud utile pour l’étude des voies de signalisation dans des modèles murins.
beta Arrestin 1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Arrb1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Arrb1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Arrb1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Arrb1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.