Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BCAS2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405943
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BCAS2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BCAS2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BCAS2 Anticuerpo (F-5): sc-376554
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BCAS2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405943 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BCAS2 (secuencia 2 amplificada en carcinoma de mama) codifica una proteína nuclear conservada que actúa como componente central del complejo del espliceosoma asociado a Prp19 y favorece el empalme del pre-ARNm y la fidelidad en la selección de los sitios de empalme. A través de sus funciones en el procesamiento de ARN y el mantenimiento del genoma, BCAS2 influye en la progresión del ciclo celular, los programas de transcripción y las respuestas al estrés celular. La alteración de la expresión de BCAS2 y la desregulación del empalme se han asociado con fenotipos oncogénicos en múltiples contextos tumorales, lo que vincula este factor con vías que controlan la proliferación y la señalización del daño en el ADN. Como regulador de la maduración del ARN, BCAS2 también es relevante para estudiar vulnerabilidades dependientes del espliceosoma y una remodelación transcriptómica amplia en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BCAS2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BCAS2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BCAS2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BCAS2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BCAS2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BCAS2 para la investigación de la señalización de BCAS2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BCAS2 críticos para la función de BCAS2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BCAS2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BCAS2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido BCAS2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BCAS2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BCAS2 (h) y el plásmido HDR BCAS2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BCAS2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BCAS2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.