B7-1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-419570-LAC

Das Mausgen *Cd80* kodiert das kostimulatorische Molekül B7-1, einen Liganden der Immunglobulin-Superfamilie, der vor allem auf antigenpräsentierenden Zellen exprimiert wird und an CD28 und CTLA-4 auf T-Zellen bindet, um Aktivierung, Proliferation und Toleranz zu modulieren. Über diese Rezeptor-Ligand-Achse trägt B7-1 zur Ausformung adaptiver Immunantworten bei und beeinflusst Zytokinprogramme, klonale Expansion sowie das Gleichgewicht zwischen Effektor- und regulatorischer T-Zell-Aktivität. Die *Cd80*-Expression wird dynamisch durch angeborene Erkennung und entzündliche Signale induziert und verknüpft so Pattern-Recognition-Signalwege mit Antigenpräsentation und Kostimulation. Eine fehlregulierte CD80-vermittelte Signalgebung wird häufig in Modellen für Autoimmunität, chronische Entzündung, Infektionen und Tumorimmunologie untersucht, in denen eine veränderte Balance zwischen Checkpoint- und kostimulatorischen Signalen die Immunüberwachung beeinflusst.

B7-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cd80-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

B7-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cd80-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen B7-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cd80-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.