Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ARID3A (h): sc-404552
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ARID3A Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ARID3A, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ARID3A Antibody (A-4): sc-398367
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ARID3A (h) | sc-404552 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ARID3A (AT-rich interaction domain 3A) est un facteur de transcription se liant à l’ADN qui régule l’accessibilité de la chromatine et des programmes d’expression génique spécifiques de lignée. Dans les systèmes hématopoïétiques, il est fortement associé au développement des lymphocytes B et à la régulation des gènes des immunoglobulines, en s’intégrant à des réseaux transcriptionnels qui coordonnent la différenciation, la prolifération et l’apoptose. L’activité d’ARID3A influence le contrôle épigénétique des loci cibles et peut moduler les réponses cellulaires à des signaux développementaux et de stress. Une expression ou une fonction dérégulée d’ARID3A a été associée à des phénotypes altérés de cellules immunitaires et a été étudiée dans des contextes incluant les hémopathies malignes et l’auto-immunité.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ARID3A (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ARID3A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ARID3A, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ARID3A à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ARID3A.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ARID3A pour l'étude de la signalisation de ARID3A, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ARID3A essentiels à la fonction de ARID3A
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ARID3A pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ARID3A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ARID3A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ARID3A. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ARID3A plasmide HDR (h) et le ARID3A (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ARID3A pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ARID3A définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.