Plasmide Double Nickase (h) Aquaporin 8/AQP8: sc-402490-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Aquaporin 8/AQP8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Aquaporin 8/AQP8 Double Nickase (h) et le plasmide Aquaporin 8/AQP8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AQP8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Aquaporin 8/AQP8 Antibody (14-Z): sc-81870
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Aquaporin 8/AQP8 | sc-402490-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Aquaporin 8/AQP8 | sc-402490-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AQP8 code l’aquaporine 8, un canal membranaire intégral qui facilite le transport transmembranaire de l’eau et peut aussi conduire de petits solutés neutres, tels que le peroxyde d’hydrogène, selon le contexte cellulaire. AQP8 contribue à l’homéostasie osmotique, à la gestion des fluides par les épithéliums et à la signalisation redox intracellulaire, reliant la perméabilité membranaire à des processus incluant la fonction mitochondriale, la régulation métabolique et la signalisation inflammatoire. Une expression ou une localisation altérée d’AQP8 a été associée à un dysfonctionnement de la barrière épithéliale et à une dérégulation des réponses au stress oxydant, des caractéristiques observées dans de multiples contextes physiopathologiques. Dans les tissus humains, AQP8 est fréquemment étudiée en lien avec la physiologie hépatobiliaire, le transport épithélial gastro-intestinal et la modulation de l’explosion oxydative des cellules immunitaires.
Aquaporin 8/AQP8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AQP8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AQP8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AQP8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AQP8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.