apoC-III Double Nickase Plasmid (h): sc-403887-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das apoC-III Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- apoC-III Double-Nickase-Plasmid (h) und apoC-III Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf APOC3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: apoC-III: sc-293227
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
apoC-III Double Nickase Plasmid (h) | sc-403887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoC-III Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **APOC3** kodiert Apolipoprotein C-III (apoC-III), ein sezerniertes Apolipoprotein, das mit triglyceridreichen Lipoproteinen assoziiert und den Transport sowie die Clearance von Lipiden im Plasma moduliert. ApoC-III beeinflusst die Aktivität der Lipoproteinlipase und hepatische Aufnahmepfade und prägt damit den Triglyceridstoffwechsel sowie das Remodelling von VLDL-/IDL-Partikeln innerhalb des übergeordneten Lipoprotein-Stoffwechselnetzwerks. Eine veränderte Expression oder Funktion von APOC3 ist mit einer gestörten Triglycerid-Homöostase und lipidassoziierten kardiometabolischen Phänotypen verbunden, was das Gen zu einem relevanten Ziel für Studien zur hepatischen Sekretion, Lipoproteinverarbeitung und systemischen Energiebilanz macht. In zellulären Modellen überschneidet sich die Regulation von APOC3 mit nährstoffsensitiven Transkriptionsprogrammen und dem sekretorischen Transport in Hepatozyten, die die Apolipoproteinproduktion steuern.
apoC-III Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des APOC3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von APOC3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die APOC3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit APOC3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.