ANKRD22 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416874-LAC

Das humane Gen **ANKRD22** codiert ein ankyrin-repeat-haltiges Protein, das an Protein-Protein-Interaktionsnetzwerken beteiligt ist, welche die Kontrolle des Zellwachstums und die metabolische Anpassung beeinflussen. Berichtetet Expressionsveränderungen über verschiedene Tumorentitäten hinweg deuten darauf hin, dass ANKRD22 mit proliferativen Signalwegen und Stressantwortprogrammen assoziiert sein kann und potenziell mit Signalwegen verknüpft ist, die mitochondriale Aktivität, Zytoskelettorganisation und transkriptionelle Regulation steuern. Als Ankyrin-Repeat-Protein ist ANKRD22 prädestiniert, den Austausch zwischen Signalwegen zu modulieren, indem es regulatorische Komplexe als Gerüstprotein zusammenführt, statt selbst enzymatisch zu wirken. Diese Eigenschaften machen ANKRD22 zu einem nützlichen Ziel, um Genregulation und kontextabhängige Phänotypen in der Krebsbiologie sowie bei Zellzustandsübergängen zu untersuchen.

ANKRD22 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ANKRD22-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ANKRD22 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ANKRD22-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ANKRD22-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ANKRD22-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.