Plásmido Doble Nickase (h) Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1: sc-400229-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 (h) y el plásmido de doble nickasa Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AGTR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 Anticuerpo (G-3): sc-515884
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 | sc-400229-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 | sc-400229-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AGTR1 codifica el receptor de angiotensina II tipo 1 (AT1), un GPCR de siete dominios transmembrana que media la mayor parte de la señalización canónica de la angiotensina II en tejidos cardiovasculares y renales. Tras la unión del ligando, AGTR1 se acopla predominantemente a Gq/11 para activar la fosfolipasa C, la movilización de calcio y la señalización de PKC, y también puede involucrar vías de MAPK/ERK, JAK/STAT, especies reactivas de oxígeno (ROS) dependientes de la NADPH oxidasa y β-arrestinas para regular programas transcripcionales, proliferación, inflamación y remodelación de la matriz extracelular. La desensibilización del receptor y su tráfico mediado por GRK y β-arrestinas moldean además la duración de la señal y los resultados de señalización sesgada. La desregulación de la señalización de AGTR1 se ha implicado en hipertensión, hipertrofia y fibrosis cardíacas, remodelación vascular y enfermedad renal, lo que respalda su uso en estudios de la biología del sistema renina-angiotensina y de las vías de respuesta al estrés.
Angiotensin Receptor/AT1/AGTR1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AGTR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AGTR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AGTR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AGTR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.