Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO AMID/AIFM2/FSP1 (h): sc-406251
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- AMID/AIFM2/FSP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique AMID/AIFM2/FSP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: AMID/AIFM2/FSP1 Antibody (B-6): sc-377120
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO AMID/AIFM2/FSP1 (h) | sc-406251 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
AIFM2, également connu sous le nom d’AMID/FSP1, code une flavoprotéine oxydoréductase impliquée dans l’homéostasie rédox et les voies de signalisation de mort cellulaire associées aux mitochondries. FSP1 agit comme une oxydoréductase de la CoQ10 dépendante du NAD(P)H au niveau des membranes, assurant une défense indépendante du glutathion contre la peroxydation lipidique et inhibant la mort cellulaire par ferroptose. En raison de ses liens avec le contrôle des espèces réactives de l’oxygène, l’intégrité des lipides membranaires et les réponses au stress apoptotique/mitochondrial, AMID/AIFM2 est fréquemment étudié en biologie du stress oxydatif et de l’adaptation métabolique. Une activité déréglée d’AIFM2/FSP1 a été associée à des contextes de résistance aux traitements et de survie des cellules tumorales, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des décisions de destin cellulaire en situation de stress.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO AMID/AIFM2/FSP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène AIFM2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du AIFM2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert AIFM2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine AMID/AIFM2/FSP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en AIFM2 pour l'étude de la signalisation de AMID/AIFM2/FSP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de AIFM2 essentiels à la fonction de AMID/AIFM2/FSP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de AIFM2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le AMID/AIFM2/FSP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le AMID/AIFM2/FSP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus AIFM2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le AMID/AIFM2/FSP1 plasmide HDR (h) et le AMID/AIFM2/FSP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie AIFM2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles AIFM2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.