Aldolase C CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419083

개요

Aldoc는 과당-1,6-이인산(fructose-1,6-bisphosphate)을 트리오스 인산으로 가역적으로 절단하는 해당과정 효소인 알돌레이스 C를 암호화하며, 이를 통해 포도당 이용을 하위 단계의 ATP 생성과 생합성 대사 흐름과 연결한다. 마우스 조직에서 ALDOC는 중추신경계에 풍부하게 발현되며, 뉴런과 교세포에서 대사의 구획화를 형성하는 데 기여해 신경전달과 산화환원 균형 같은 과정을 뒷받침한다. 해당과정 외에도 알돌레이스 계열 단백질은 대사와 세포 구조를 연결하는 단백질-단백질 상호작용을 통해 세포골격 조직화와 신호전달에 영향을 줄 수 있다. ALDOC 발현 변화는 신경생물학에서 대사 상태와 세포 정체성의 표지자로 활용되어 왔고, 해당과정 프로그램의 이상 조절은 신경퇴행, 허혈성 스트레스 반응, 증식성 질환 모델 전반과 널리 관련된다.

Aldolase C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Aldoc 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Aldoc 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Aldoc의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Aldolase C 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Aldolase C 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Aldoc 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Aldolase C 기능에 중요한 Aldoc 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Aldoc 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Aldolase C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Aldolase C CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Aldoc 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Aldolase C HDR 플라스미드 (m) 및 Aldolase C HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Aldoc 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Aldoc 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.