Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406553

개요

인간 ALDH6A1 유전자는 미토콘드리아 메틸말로네이트 세미알데하이드 탈수소효소를 암호화하며, 이는 메틸말로네이트 세미알데하이드를 프로피오닐-CoA로 산화하는 NAD(P)+ 의존성 효소로서 발린 및 피리미딘 분해대사 과정에서 작용한다. ALDH6A1은 프로피오닐-CoA 대사와 그 하위의 보충(애너플레로틱) 경로로 탄소를 공급함으로써, 가지사슬 아미노산의 회전을 미토콘드리아 에너지 항상성과 산화환원 균형에 연결한다. ALDH6A1 활성의 교란은 유기산 프로파일과 미토콘드리아 스트레스 반응을 변화시킬 수 있어, 선천성 대사 이상 및 보다 광범위한 미토콘드리아 기능장애 표현형 연구에서 중요한 표적이 된다. 또한 아미노산 분해대사가 증식 또는 스트레스 적응 상태를 지지하는 대사 재프로그래밍 맥락에서도 그 발현과 기능이 관심 대상이다.

Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ALDH6A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ALDH6A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ALDH6A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ALDH6A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 기능에 중요한 ALDH6A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ALDH6A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ALDH6A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 HDR 플라스미드 (h) 및 Aldehyde dehydrogenase 6-A1/ALDH6A1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ALDH6A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ALDH6A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.