Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
AIP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417914
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- AIP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico AIP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: AIP2 Anticuerpo (A-3): sc-398090
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
AIP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417914 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
WWP2 codifica la ligasa E3 de ubiquitina AIP2, una ligasa de ubiquitina con dominio HECT que cataliza la transferencia de ubiquitina para regular la estabilidad de las proteínas y la salida de señalización. AIP2 participa en el control dependiente de ubiquitina de procesos celulares clave, entre ellos la proteostasis, el recambio de receptores y factores de transcripción, y el ajuste fino de vías en contextos como la señalización TGF-β/SMAD y redes reguladoras relacionadas. A través de estas funciones, WWP2 contribuye a la modulación de programas de crecimiento celular, diferenciación y transición epitelio-mesenquimal. La ubiquitinación desregulada en la que participa WWP2 se ha asociado con estados de señalización alterados observados en múltiples modelos relevantes para enfermedades, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de desequilibrio de vías.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO AIP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen WWP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del WWP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de WWP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AIP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en WWP2 para la investigación de la señalización de AIP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de WWP2 críticos para la función de AIP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de WWP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido AIP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido AIP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus WWP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AIP2 (h) y el plásmido HDR AIP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología WWP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana WWP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.