Date published: 2026-7-23

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AFP/Alpha fetoprotein Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400355-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • AFP/Alpha fetoproteinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase AFP/Alpha fetoprotein (h) e o Plasmídeo Double Nickase AFP/Alpha fetoprotein (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AFP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AFP/Alpha fetoprotein Anticorpo (C3): sc-8399
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    AFP/Alpha fetoprotein Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-400355-NIC
    20 µg
    $410.00

    AFP/Alpha fetoprotein Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-400355-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene AFP codifica a alfa-fetoproteína, uma glicoproteína secretada altamente expressa durante o desenvolvimento fetal e normalmente silenciada no período pós-natal na maioria dos tecidos. A AFP está associada a programas de diferenciação de hepatócitos e à transição transcricional do estado fetal para o adulto, e sua reexpressão reflete uma regulação gênica alterada em contextos hepáticos e de células germinativas. Na biologia do câncer, a AFP é amplamente utilizada como marcador molecular associado ao carcinoma hepatocelular e a certos tumores de células germinativas, dando suporte a estudos sobre o estado celular tumoral, identidade de linhagem e redes transcricionais oncogênicas. Como antígeno circulante e associado ao tumor, a AFP também serve como um indicador para investigar a dinâmica da via secretória e alterações na produção de proteínas relacionadas ao estresse.

    AFP/Alpha fetoprotein O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AFP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AFP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AFP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AFP interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.