Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ACSL5 (m): sc-436628
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ACSL5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ACSL5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ACSL5 Antibody (A-2): sc-365478
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ACSL5 (m) | sc-436628 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Acsl5 code l’acyl‑CoA synthétase de la famille des longues chaînes, membre 5 (ACSL5), une enzyme associée aux mitochondries et au réticulum endoplasmique qui active les acides gras à longue chaîne en thioesters d’acyl‑CoA, les engageant ainsi dans la β‑oxydation, la synthèse des triglycérides et le remodelage des phospholipides. En modulant la composition du pool d’acyl‑CoA, ACSL5 influence l’homéostasie énergétique, la composition lipidique membranaire et les voies de signalisation dérivées des lipides liées au métabolisme mitochondrial et au stress oxydatif. Dans des tissus murins à forte demande métabolique, des altérations de l’activité d’ACSL5 ont été associées à des perturbations de l’utilisation des acides gras et des voies sensibles à l’insuline, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de la dérégulation métabolique et des phénotypes inflammatoires associés aux lipides.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ACSL5 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Acsl5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Acsl5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Acsl5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ACSL5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Acsl5 pour l'étude de la signalisation de ACSL5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Acsl5 essentiels à la fonction de ACSL5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Acsl5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ACSL5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ACSL5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Acsl5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ACSL5 plasmide HDR (m) et le ACSL5 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Acsl5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Acsl5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.