Acrosin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402292

개요

ACR은 아크로신(acrosin)이라는 세린 프로테아제를 암호화하며, 아크로신은 효소 전구체인 프로아크로신(proacrosin, 지모겐) 형태로 합성된 뒤 사람 정자의 첨체(acrosome)에 저장된다. 정자 수정능 획득(capacitation)과 첨체반응(acrosome reaction)이 일어나면 아크로신은 조절된 단백질 분해와 기질 결합에 관여하여, 정자가 투명대(zona pellucida)와 상호작용하고 수정 과정에서 세포외기질을 통과해 나아가는 데 기여한다. 아크로신의 활성은 첨체의 외배출(exocytosis), 프로테아제 활성화 연쇄반응, 그리고 배우자 인식 과정에서 정자 표면 단백질의 재구성과 연관된다. ACR 발현 변화나 아크로신 기능 이상은 남성 생식생물학 및 불임 관련 표현형의 맥락에서 연구되며, 정자–투명대 결합 장애와 수정 능력 저하 등이 포함된다.

Acrosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ACR 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ACR 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ACR의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Acrosin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Acrosin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ACR 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Acrosin 기능에 중요한 ACR 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ACR 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Acrosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Acrosin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ACR 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Acrosin HDR 플라스미드 (h) 및 Acrosin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ACR 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ACR 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.