Plasmide Double Nickase (h) ABHD2: sc-411559-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ABHD2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ABHD2 Double Nickase (h) et le plasmide ABHD2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABHD2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ABHD2 | sc-411559-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABHD2 (abhydrolase domain containing 2) code une hydrolase à sérine humaine associée à des compartiments membranaires, où elle contribue au métabolisme des lipides et à la signalisation dérivée des lipides. En tant que membre de la famille d’enzymes à repliement α/β-hydrolase, l’activité d’ABHD2 s’inscrit à l’interface de voies qui régulent les lipides bioactifs, la composition membranaire et les réponses en aval de type seconds messagers, influençant la signalisation cellulaire et la régulation des canaux ioniques. L’expression et la fonction enzymatique d’ABHD2 ont été étudiées dans le contexte de la biologie de la reproduction, ainsi que de phénotypes métaboliques et de signalisation plus larges, où une gestion dérégulée des lipides peut contribuer à des états cellulaires associés à des maladies. Ces caractéristiques font d’ABHD2 une cible utile pour des études reliant l’enzymologie des lipides aux réseaux de signalisation et à la modulation des phénotypes dans des modèles de cellules humaines.
ABHD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABHD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABHD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABHD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABHD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.