
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
A1 CRISPR 활성화 플라스미드(h) | sc-416421-ACT | 20 µg | $397.00 |
인간 BCL2A1 유전자는 항아폽토시스성 BCL-2 계열 단백질 A1을 암호화한다. A1은 미토콘드리아 외막에서 작동하는 조절자로서, BH3-only 단백질을 격리하고 BAX/BAK 매개 미토콘드리아 외막 투과화(MOMP)를 제한함으로써 세포 생존을 유지한다. A1은 NF-κB 의존적 전사 프로그램을 포함한 염증 및 스트레스 반응 경로의 신호를 통합하여 아폽토시스, 세포 생존, 면역세포 항상성을 조절한다. BCL2A1 발현은 조혈계 계통에서 흔히 유도될 수 있으며, 활성화 및 분화 과정에서 아폽토시스 유발 신호에 대한 민감도에 영향을 줄 수 있다. BCL2A1의 기능 및 발현 조절 이상은 암 생물학과 염증성 환경에서 아폽토시스 역치 변화와 생존 표현형과 연관되어 보고되어 왔으며, 이는 세포 운명 제어의 기전 연구를 뒷받침한다.
A1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 BCL2A1 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
A1 CRISPR 활성화 플라스미드(h)는 인간 세포주에서 BCL2A1 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 BCL2A1 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 A1 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 BCL2A1 위치를 보존하고 내인성 위치에서 A1 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 BCL2A1 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 A1 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.