Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
14-3-3 η Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402892-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- 14-3-3 ηO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase 14-3-3 η (h) e o Plasmídeo Double Nickase 14-3-3 η (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para YWHAH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:14-3-3 η Anticorpo (6A12): sc-293464
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
14-3-3 η Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402892-NIC | 20 µg | $410.00 |
YWHAH codifica a proteína adaptadora humana 14-3-3 η, membro de uma família conservada que se liga a motivos de fosfoserina/fosfotreonina para regular a localização, a estabilidade e a atividade de diversas proteínas cliente. Por meio dessas interações, a 14-3-3 η integra nós de sinalização que controlam a progressão do ciclo celular, a apoptose, as respostas ao estresse e a organização do citoesqueleto, com conexões proeminentes às vias MAPK/ERK, PI3K–AKT e a outras vias dependentes de quinases. Ao modular complexos dependentes de fosforilação, YWHAH contribui para o desenvolvimento neuronal e a função sináptica, bem como para a proteostase geral e a fidelidade da sinalização. A desregulação da sinalização da família 14-3-3 tem sido associada a fenótipos neuropsiquiátricos e neurodegenerativos e a programas alterados de crescimento e sobrevivência relevantes para a biologia do câncer, tornando YWHAH um alvo útil para estudos mecanísticos de vias de sinalização.
14-3-3 η O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus YWHAH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de YWHAH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função YWHAH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com YWHAH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.