β-1,4-Gal-T4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407251

개요

B4GALT4는 골지체에 존재하는 β-1,4-갈락토실전이효소인 β-1,4-Gal-T4를 암호화하며, N-아세틸글루코사민(GlcNAc)에 갈락토스를 전이해 N- 및 O-결합 당단백질과 당지질에서 type II 락토사민 단위를 형성합니다. 당화(glycosylation)에 기여함으로써 β-1,4-Gal-T4는 단백질 접힘, 수송(트래픽킹), 수용체의 체류 시간, 그리고 당 결합 단백질에 의해 매개되는 세포–세포 또는 세포–기질 상호작용에 영향을 미칩니다. 갈락토실화의 변화와 락토사민 연장은 신호전달 네트워크와 면역 인식을 재구성할 수 있으며, B4GALT4 의존적 글리칸 리모델링을 염증 및 종양세포 거동과 같은 질병 관련 과정과 연결합니다. 더 넓은 글리코실전이효소 네트워크의 일부로서 B4GALT4는 접착, 이동, 분화 프로그램에 영향을 미치는 세포 표면 글라이콤 조성을 규정하는 데 기여합니다.

β-1,4-Gal-T4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 B4GALT4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 B4GALT4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 B4GALT4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 β-1,4-Gal-T4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 β-1,4-Gal-T4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 B4GALT4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• β-1,4-Gal-T4 기능에 중요한 B4GALT4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 B4GALT4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• β-1,4-Gal-T4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 β-1,4-Gal-T4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 B4GALT4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  β-1,4-Gal-T4 HDR 플라스미드 (h) 및 β-1,4-Gal-T4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 B4GALT4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 B4GALT4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.