CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
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α1A-AR 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-419021-NIC
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- α1A-AR Double Nickase Plasmid (m) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- α1A-AR 더블 니케이스 플라스미드 (m) 및 α1A-AR 더블 니케이스 플라스미드 (m2)는 Adra1a을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 α1A-AR Antibody (4D8): sc-100291
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
α1A-AR 더블 틈내기효소 플라스미드 (m) | sc-419021-NIC | 20 µg | $410.00 |
Adra1a는 마우스 α1A-아드레날린 수용체(α1A-AR)를 암호화하며, 이는 주로 Gq/11에 결합하는 G 단백질 연결 수용체(GPCR)로서 포스포리파아제 C 신호전달, 이노시톨 인산 생성, 세포내 Ca2+ 동원, PKC 활성화를 촉진합니다. 이러한 경로를 통해 α1A-AR는 평활근 긴장도, 혈관 반응성, 교감신경성 신경전달을 조절하고, 하위의 MAPK/ERK 신호전달도 활성화하여 세포 증식과 스트레스 반응에 영향을 줄 수 있습니다. 신경계와 말초 장기에서 Adra1a의 활성은 카테콜아민 신호를 이온 채널 기능 및 수축 기전과 통합합니다. α1A-AR가 관여하는 아드레날린성 신호전달의 이상 조절은 심혈관 및 자율신경계 표현형과 연관되어 왔으며, 신경생리에서의 역할도 맥락에 따라 달라지는 것으로 보고되어 Adra1a는 GPCR 기반 신호 네트워크를 해부하는 데 유용한 표적입니다.
α1A-AR 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Adra1a 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Adra1a 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Adra1a의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Adra1a 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.