α_1A-AR 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401726-NIC

ADRA1A는 인간 알파1A-아드레날린성 수용체(α1A-AR)를 암호화하며, 이 수용체는 주로 Gq/11에 결합하는 G 단백질 연결 수용체(GPCR)로서 포스포리파아제 C(PLC) 신호전달, 이노시톨 3인산(IP3) 의존적 Ca2+ 동원, 단백질 키나아제 C(PKC) 활성화를 유도합니다. 이러한 경로를 통해 α1A-AR는 평활근 수축, 혈관 긴장도, 신경전달을 조절하고, 하위 단계에서 MAPK/ERK 신호 및 더 광범위한 전사 반응에도 영향을 미칩니다. ADRA1A의 발현과 신호 균형은 심혈관 및 비뇨생식기 생리에서 아드레날린성 조절에 기여하며, 그 이상 조절은 교감신경 신호 변화 및 조직 재형성과 관련된 상태와 연관됩니다. 또한 세포 표면에 존재하고 2차 전달자 출력이 잘 규정된 GPCR로서, 수용체 탈감작(desensitization), 편향 신호전달(biased signaling), 그리고 다른 GPCR 및 성장인자 경로와의 크로스토크를 연구하는 데 흔히 사용됩니다.

α1A-AR 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ADRA1A 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ADRA1A 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ADRA1A의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ADRA1A 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.