ZRSR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423570

概要

Zrsr1は、スプライソソーム関連因子であるZRSR1をコードしており、pre-mRNAスプライシングにおけるU12型イントロンの認識と処理に関与するとされています。マイナースプライソソームの活性に影響を与えることで、ZRSR1は転写産物の成熟、アイソフォームのバランス、さらに細胞周期制御や分化に関連する下流の遺伝子発現プログラムに作用し得ます。マウスでは、Zrsr1はゲノムインプリンティングおよび親由来効果（parent-of-origin effects）の文脈でも注目されており、RNAプロセシングのアレル特異的制御を研究するための枠組みを提供します。マイナーイントロンのスプライシング異常は、複数のモデル系において発生異常や造血機能障害と関連づけられているため、Zrsr1はスプライシング関連疾患の生物学的機序を解明する研究において重要な対象となります。

ZRSR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZrsr1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zrsr1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zrsr1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZRSR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZRSR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zrsr1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZRSR1の機能に不可欠なZrsr1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zrsr1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZRSR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZRSR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zrsr1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZRSR1 HDRプラスミド（m）および ZRSR1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZrsr1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZrsr1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。