ZnT-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405830

概要

SLC30A7は亜鉛トランスポーターZnT-7をコードしており、細胞質から細胞内コンパートメントへ亜鉛を排出することで亜鉛恒常性と、区画化された金属イオンの利用可能性を維持するSLC30（ZnT）ファミリーの一員です。分泌経路およびエンドメンブレン系における亜鉛の分布を調節することで、ZnT-7はメタロタンパク質の活性、レドックスバランス、ならびに細胞代謝やストレス応答を形作る亜鉛依存的シグナル伝達過程に影響を与えます。亜鉛輸送の異常は、インスリン顆粒の生物学、炎症シグナル、酸化ストレスの破綻と関連づけられており、SLC30A7は代謝機能障害および関連する複雑な疾患機構の研究において注目されています。亜鉛恒常性の調節因子として、ZnT-7はヒト細胞におけるオルガネラ機能や金属依存性酵素の成熟に関する研究においても重要です。

ZnT-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC30A7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC30A7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC30A7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZnT-7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZnT-7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC30A7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZnT-7の機能に不可欠なSLC30A7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC30A7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZnT-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZnT-7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC30A7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZnT-7 HDRプラスミド（h）および ZnT-7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC30A7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC30A7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。