Plasmide Double Nickase (h) ZNRF2: sc-408350-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNRF2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNRF2 Double Nickase (h) et le plasmide ZNRF2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNRF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNRF2 | sc-408350-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain ZNRF2 code une ligase E3 de l’ubiquitine de type RING, qui contribue au contrôle ubiquitine‑dépendant du renouvellement des protéines et des sorties de signalisation. En modulant l’ubiquitination de ses substrats, ZNRF2 peut influencer des processus cellulaires tels que la signalisation des récepteurs et des kinases, la protéostasie et l’adaptation des voies aux signaux environnementaux. Une activité de ligase ubiquitine dysrégulée est fréquemment associée à des altérations du contrôle de la croissance et des réponses au stress, ce qui fait de ZNRF2 un nœud utile pour disséquer les mécanismes reliant l’ubiquitination au remodelage des voies de signalisation. Les recherches sur ZNRF2 soutiennent l’étude de la fidélité de la signalisation, de la stabilité des protéines et de circuits régulateurs dépendants du contexte, pertinents pour des phénotypes cellulaires associés aux maladies.
ZNRF2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNRF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNRF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNRF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNRF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.