Plasmide Double Nickase (h) ZNF43: sc-416697-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNF43 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNF43 Double Nickase (h) et le plasmide ZNF43 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF43. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNF43 | sc-416697-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ZNF43 | sc-416697-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF43 code une protéine à doigts de zinc dont on prévoit qu’elle intervient dans la liaison à l’ADN de manière spécifique de la séquence et dans la régulation de programmes d’expression génique qui façonnent l’état cellulaire et la transcription propre à certaines lignées. En tant que facteur nucléaire putatif, ZNF43 est pertinent pour des voies impliquées dans l’organisation de la chromatine, la dynamique de répression/activation transcriptionnelle et le maintien de la stabilité génomique via le contrôle coordonné de gènes cibles en aval. Des réseaux de protéines à doigts de zinc altérés sont fréquemment associés à une différenciation dérégulée et à la signalisation de réponse au stress, ce qui justifie l’étude de ZNF43 dans des modèles de prolifération et de transformation cellulaires. La perturbation fonctionnelle de ZNF43 soutient des études mécanistiques des circuits transcriptionnels et des relations génotype–phénotype dans les cellules humaines.
ZNF43 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF43 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF43. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF43. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF43.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.