ZFP101 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423758

概要

マウスのZfp101は、配列特異的なDNA結合と転写制御に関与すると予測されるC2H2型ジンクフィンガータンパク質ZFP101をコードしています。推定される核内因子として、ZFP101は、増殖・分化・ストレス応答性転写といった細胞状態の遷移を協調させる遺伝子発現プログラムを、クロマチンに関連した形で制御することに寄与する可能性があります。ジンクフィンガーを介した制御ネットワークの攪乱は、発生表現型の基盤となる機構や、がんおよび神経発達障害を含む複雑疾患で観察される転写異常の機構に広く関係します。そのためZfp101は、転写抑制因子／活性化因子が下流シグナル伝達やゲノムワイドな発現パターンをどのように形成するかを、マウスモデル系で検証するための有用な遺伝子座です。

ZFP101 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZfp101遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zfp101内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zfp101のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZFP101タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZFP101シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zfp101欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZFP101の機能に不可欠なZfp101エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zfp101ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZFP101 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZFP101 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zfp101遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZFP101 HDRプラスミド（m）および ZFP101 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZfp101ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZfp101標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。