Plásmido Doble Nickase (m) ZC3H14: sc-429118-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ZC3H14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZC3H14 (m) y el plásmido de doble nickasa ZC3H14 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Zc3h14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ZC3H14 | sc-429118-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Zc3h14** codifica **ZC3H14**, una proteína de unión a ARN con dedos de zinc tipo CCCH que se asocia con ARN poli(A) y regula el control génico postranscripcional mediante efectos sobre la poliadenilación del ARNm, su estabilidad y su traducción. ZC3H14 contribuye a programas de procesamiento de ARN que moldean la expresión génica durante el desarrollo neuronal y la función sináptica, lo que la vincula con vías más amplias del metabolismo del ARNm en el núcleo y el citoplasma. La alteración de ortólogos de ZC3H14 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con cambios en la expresión génica neuronal, lo que hace que este factor sea relevante para estudios mecanísticos de la regulación del ARN en tipos celulares pertinentes para el cerebro. Como regulador conservado del destino del ARNm, ZC3H14 se investiga con frecuencia en modelos de diferenciación neuronal, dinámica de gránulos de ARN y homeostasis del largo de la cola poli(A) a escala del transcriptoma.
ZC3H14 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Zc3h14 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Zc3h14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Zc3h14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Zc3h14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.