ZBTB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432923

Visão geral

Zbtb5 codifica a ZBTB5, um fator de transcrição com domínios BTB/POZ e dedos de zinco C2H2 que permite a ligação ao DNA dependente de sequência e a montagem de complexos regulatórios que controlam programas de expressão gênica. Em células de camundongo, fatores da família ZBTB são comumente associados à repressão transcricional dependente de cromatina ou à ativação dependente do contexto por meio do recrutamento de correpressores/coativadores, moldando processos como progressão do ciclo celular, comprometimento de linhagem e diferenciação celular. Ao influenciar redes transcricionais que governam a proliferação e o estado de desenvolvimento, ZBTB5 é relevante para estudos mecanísticos da desregulação da expressão gênica observada na transformação oncogênica e em outras patologias associadas à transcrição. A investigação funcional de Zbtb5 pode esclarecer como proteínas BTB–dedo de zinco integram a atividade de promotores e enhancers para coordenar vias a jusante.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZBTB5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zbtb5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zbtb5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zbtb5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZBTB5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zbtb5 para a investigação da sinalização de ZBTB5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zbtb5 críticos para a função ZBTB5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zbtb5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZBTB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ZBTB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zbtb5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZBTB5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ZBTB5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zbtb5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zbtb5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.