ZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432923

概要

Zbtb5はZBTB5をコードしており、ZBTB5はBTB/POZドメインとC2H2型ジンクフィンガーをもつ転写因子です。配列特異的なDNA結合と、遺伝子発現プログラムを制御する制御複合体の形成を担います。マウス細胞では、ZBTBファミリー因子はコレギュレーターのリクルートを介したクロマチン依存的な転写抑制、あるいは状況依存的な転写活性化に関与することが多く、細胞周期の進行、系譜決定、細胞分化といった過程を形作ります。増殖や発生状態を司る転写ネットワークに影響を与えることから、ZBTB5は、がん化に伴う形質転換やその他の転写関連病態でみられる遺伝子制御異常の機構解析において重要です。Zbtb5の機能解析により、BTB–ジンクフィンガータンパク質がプロモーターおよびエンハンサー活性をどのように統合し、下流経路を協調的に制御するのかを明らかにできます。

ZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZbtb5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zbtb5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zbtb5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZBTB5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZBTB5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zbtb5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZBTB5の機能に不可欠なZbtb5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zbtb5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZBTB5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zbtb5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZBTB5 HDRプラスミド（m）および ZBTB5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZbtb5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZbtb5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。