ZBTB4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404975

概要

ZBTB4（ジンクフィンガーおよびBTBドメイン含有タンパク質4）は、メチル化CpG DNAに結合する配列特異的な転写調節因子であり、遺伝子発現のエピジェネティック制御に寄与します。BTB/POZドメインとジンクフィンガーモチーフを介して、ZBTB4はクロマチン関連の抑制プログラムに関与し、細胞周期の進行、DNA損傷応答、分化に伴う転写状態に影響を与えます。ZBTB4の発現や活性の変化は、複数のがん種において増殖制御の破綻や浸潤性表現型と関連づけられており、転写恒常性の維持に関与することと整合します。さらに、メチル化感受性因子としてのZBTB4は、DNAメチル化パターンと下流の転写出力、ならびにゲノム安定性を結び付けて理解する研究においても重要です。

ZBTB4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZBTB4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZBTB4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZBTB4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZBTB4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZBTB4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZBTB4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZBTB4の機能に不可欠なZBTB4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZBTB4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZBTB4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZBTB4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZBTB4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZBTB4 HDRプラスミド（h）および ZBTB4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZBTB4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZBTB4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。