Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) XPA: sc-401483-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) XPA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide XPA Double Nickase (h) et le plasmide XPA Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant XPA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: XPA Antibody (B-1): sc-28353
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) XPA | sc-401483-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) XPA | sc-401483-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XPA (xeroderma pigmentosum, groupe A) code un facteur central de reconnaissance et de vérification des dommages à l’ADN dans la réparation par excision de nucléotides (NER), où il stabilise les intermédiaires de réparation et coordonne le recrutement des endonucléases ainsi que de la protéine A de réplication (RPA) aux sites de lésions volumineuses déformant la double hélice. La protéine XPA est essentielle à l’élimination des photoproduits induits par les UV et des adduits chimiques, préservant ainsi l’intégrité du génome et limitant la mutagenèse lors de la réplication et de la transcription. Une altération de la fonction de XPA est associée à la maladie due à un déficit de réparation de l’ADN, le xeroderma pigmentosum, et le statut de XPA est largement utilisé pour évaluer la capacité de la NER, les réponses au stress réplicatif et les interactions (crosstalk) de la signalisation des dommages à l’ADN.
XPA Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus XPA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de XPA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de XPA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de XPA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.