Plásmido Doble Nickase (h) Xanthine Oxidase: sc-401185-NIC

XDH codifica la xantina oxidasa, una oxidorreductasa que contiene molibdeno y que cataliza las etapas terminales del catabolismo de las purinas al convertir la hipoxantina en xantina y la xantina en ácido úrico. Durante estas reacciones, la enzima puede generar especies reactivas de oxígeno, lo que vincula la actividad de XDH con la homeostasis redox, la señalización del estrés oxidativo y las respuestas inflamatorias. La función de la xantina oxidasa se entrecruza con vías de adaptación metabólica y procesos de lesión tisular en los que aumentan el recambio de purinas y la producción de oxidantes. La expresión o actividad desregulada de XDH se ha asociado con biología relacionada con la hiperuricemia, disfunción endotelial y daño oxidativo en contextos de enfermedades cardiometabólicas e inflamatorias, lo que respalda su uso como diana mecanística en investigación sobre metabolismo y respuesta al estrés.

Xanthine Oxidase El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus XDH en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de XDH. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de XDH. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con XDH alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.