Wnt-7b CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423722

概要

Wnt7b は分泌性糖タンパク質である Wnt-7b をコードしており、Wnt-7b はカノニカルおよびノンカノニカル Wnt シグナル伝達を活性化するリガンドとして、マウスにおける胚発生および出生後の恒常性維持の過程で、細胞運命決定、増殖、極性、組織パターニングを制御する。Wnt-7b が Frizzled/LRP 受容体に結合すると、β-カテニン依存的な転写に加えて、平面細胞極性（PCP）や Ca²⁺ 関連経路にも影響を及ぼし、上皮―間葉相互作用や器官形態形成を方向づける。Wnt7b 活性の異常は、複数の組織環境において、がん原性シグナル、線維化、炎症性微小環境と交差する異常な発生プログラムやリモデリング過程と関連づけられている。経路の結節点として、Wnt-7b は幹／前駆細胞の挙動、血管および気道の生物学、ならびに TGF-β、Hedgehog、Notch シグナルとのクロストークにおける役割の観点から、しばしば研究されている。

Wnt-7b CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるWnt7b遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Wnt7b内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Wnt7bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Wnt-7bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Wnt-7bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Wnt7b欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Wnt-7bの機能に不可欠なWnt7bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Wnt7bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Wnt-7b CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびWnt-7b CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Wnt7b遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Wnt-7b HDRプラスミド（m）および Wnt-7b HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはWnt7bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のWnt7b標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。