WDTC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411657

Visão geral

WDTC1 (também conhecido como fator regulador da adipogênese) codifica uma proteína contendo repetições WD e um domínio TPR, implicada no controle do armazenamento de lipídios e de programas de diferenciação de adipócitos. Funções descritas relacionam o WDTC1 a mecanismos regulatórios dependentes de ubiquitina e a redes transcricionais que influenciam o balanço energético celular, com efeitos downstream sobre a expressão de genes adipogênicos e a homeostase metabólica. Alterações na atividade de WDTC1 têm sido associadas a fenótipos relevantes para obesidade e para uma desregulação metabólica mais ampla, tornando-o útil em estudos mecanísticos de acúmulo de gordura e sinalização responsiva a nutrientes. Em modelos celulares, a perturbação de WDTC1 pode ajudar a investigar vias que regulam a biologia de gotículas lipídicas, a adipogênese e respostas ao estresse metabólico.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO WDTC1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WDTC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WDTC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WDTC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína WDTC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WDTC1 para a investigação da sinalização de WDTC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WDTC1 críticos para a função WDTC1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WDTC1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo WDTC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo WDTC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WDTC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo WDTC1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR WDTC1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WDTC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WDTC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.