WDR36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-410298

概要

WDR36（WD repeat domain 36）は、リボソーム生合成およびpre-rRNAプロセシングに関与するとされる核小体局在のWDリピートタンパク質をコードしており、18S rRNAの成熟とリボソーム小サブユニットの組み立てを支えます。核小体機能とRNA代謝における役割を通じて、WDR36は、効率的な翻訳に依存するプロテオスタシスや細胞増殖プログラムにも影響を及ぼします。遺伝的変異やWDR36機能の変化は、原発開放隅角緑内障などを含む眼科的表現型と関連づけられており、関連する細胞種における機序解明研究を促しています。WDR36の破綻はまた、リボソーム産生の攪乱が核小体ストレス応答や下流シグナル伝達をどのように惹起するかを調べるための手段としても利用できます。

WDR36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるWDR36遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、WDR36内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、WDR36のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、WDR36タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、WDR36シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、WDR36欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• WDR36の機能に不可欠なWDR36エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、WDR36ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• WDR36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびWDR36 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、WDR36遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  WDR36 HDRプラスミド（h）および WDR36 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはWDR36ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のWDR36標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。