WDR24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407847

概要

WDR24はWDリピート含有タンパク質をコードしており、アミノ酸感知によるmTORC1シグナル伝達の制御における主要な調節因子であるGATOR2複合体の中核構成要素として機能します。GATOR1活性を調節することで、WDR24は栄養状態とリソソーム上でのmTORC1活性化の連動に寄与し、オートファジー、タンパク質合成、細胞増殖プログラムに影響を与えます。この制御軸の攪乱は代謝恒常性やストレス応答を変化させ得るため、WDR24関連経路は、がん代謝、神経生物学、その他mTORC1の制御異常が関与すると考えられる文脈で頻繁に研究される機構とも結び付けられます。したがってWDR24は、栄養シグナル伝達回路およびその下流にある転写・翻訳出力を解明するうえで重要です。

WDR24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるWDR24遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、WDR24内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、WDR24のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、WDR24タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、WDR24シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、WDR24欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• WDR24の機能に不可欠なWDR24エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、WDR24ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• WDR24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびWDR24 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、WDR24遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  WDR24 HDRプラスミド（h）および WDR24 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはWDR24ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のWDR24標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。