VpreB1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-423683
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- VpreB1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在VpreB1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
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VpreB1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-423683 | 20 µg | $397.00 |
概述
Vpreb1 编码 VpreB1（替代轻链组分之一），在小鼠早期 B 淋巴细胞发生过程中与 λ5（IGLL1）及免疫球蛋白 μ 重链配对，形成前 B 细胞受体（pre-BCR）。pre-BCR 信号通过促进增殖、强化重链等位基因排除，并启动轻链重排，来协调从前体 B 细胞（pro–B）到前 B 细胞（pre–B）阶段的检查点推进；其涉及与 SRC 家族激酶、SYK/BTK 信号以及下游 PI3K–AKT 和 MAPK 程序相交汇的通路。该轴一旦受扰，会打乱 B 细胞发育动力学，改变受体库形成，并可能影响免疫功能与免疫耐受机制。由于 pre-BCR 功能与发育检查点控制紧密相关，Vpreb1 常用于研究异常 B 细胞成熟与免疫失衡的模型，在血液学与自身免疫相关研究中具有意义。
VpreB1 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Vpreb1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Vpreb1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Vpreb1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使VpreB1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Vpreb1缺失的细胞模型，用于VpreB1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 VpreB1 功能至关重要的 Vpreb1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Vpreb1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 VpreB1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 VpreB1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Vpreb1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 VpreB1 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 VpreB1 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Vpreb1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Vpreb1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。