VDAC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423662

概要

Vdac2は、電位依存性アニオンチャネル2（VDAC2）をコードしており、細胞質とミトコンドリア間の代謝物およびイオンのフラックスを調節する、ミトコンドリア外膜の主要なポーリンです。VDAC2は、ATP/ADP交換に影響を与え、内膜の輸送過程とのカップリングを介して、ミトコンドリア呼吸、レドックス恒常性、ならびにCa²⁺依存性シグナル伝達に関与します。また、ミトコンドリア外膜透過化の制御やBCL-2ファミリータンパク質との相互作用を通じて内因性アポトーシスを調節し、ミトコンドリア代謝を細胞運命の決定と結び付けます。VDAC2関連経路の機能異常は、神経変性、心代謝疾患の機序、がん細胞の生存表現型に関係するエネルギー代謝の変化やストレス応答の異常に関与すると示唆されています。

VDAC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるVdac2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Vdac2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Vdac2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、VDAC2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、VDAC2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Vdac2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• VDAC2の機能に不可欠なVdac2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Vdac2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• VDAC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびVDAC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Vdac2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  VDAC2 HDRプラスミド（m）および VDAC2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVdac2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVdac2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。