VCPIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409332-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VCPIP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VCPIP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase VCPIP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VCPIP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VCPIP1 Anticorpo (C-12): sc-515291
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VCPIP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409332-NIC | 20 µg | $410.00 |
VCPIP1 (proteína 1 que interage com a proteína contendo valosina) codifica uma enzima desubiquitinante que se associa à ATPase AAA+ VCP/p97 para regular o controle de qualidade de proteínas dependente de ubiquitina. Por meio da atividade catalítica do seu domínio OTU, a VCPIP1 participa da degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD), do tráfego de membranas e da proteostase, ao editar cadeias de ubiquitina em substratos selecionados e coordenar seu processamento pela maquinaria VCP/p97. A ruptura da homeostase de ubiquitina ligada à VCP/p97 está associada a sinalização de estresse celular, dinâmica de organelas comprometida e vias relacionadas à neurodegeneração, tornando a VCPIP1 um ponto relevante para estudar como o remodelamento de ubiquitina influencia a resiliência ao estresse e as redes de degradação. A regulação alterada dessas vias também é estudada no contexto da adaptação de células cancerígenas ao estresse proteotóxico e à sinalização de ubiquitina desregulada.
VCPIP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VCPIP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VCPIP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VCPIP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VCPIP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.