Vav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401490

概要

VAV2はVav2をコードしており、Vav2は多ドメイン構造をもつグアニンヌクレオチド交換因子（GEF）として、受容体型チロシンキナーゼおよびインテグリンシグナルの下流でRAC1やCDC42などのRhoファミリーGTPaseを活性化します。DH-PH触媒コアとSH2/SH3を介した相互作用を通じて、Vav2はアクチン細胞骨格の再編成、膜ラッフリング、そして細胞移動・接着を支えるフォーカルアドヒージョンのダイナミクスを統合的に制御します。Vav2依存的シグナルはPI3K、MAPK、Srcファミリーキナーゼのネットワークなどの経路とも交差し、細胞外からの刺激を転写応答および細胞骨格の出力へと結び付けます。VAV2の活性や発現の異常は、複数の疾患関連コンテキストにおいて浸潤性の変化やシグナルの再配線と関連しており、運動性やシグナル伝達の機構研究における有用なノードとなっています。

Vav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるVAV2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、VAV2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、VAV2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Vav2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Vav2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、VAV2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Vav2の機能に不可欠なVAV2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、VAV2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Vav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびVav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、VAV2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Vav2 HDRプラスミド（h）および Vav2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVAV2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVAV2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。